Células Hek 293

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Descripción de la línea celular

Las células HEK 293 son una línea celular transformada derivadas de preparaciones de riñón embriónico humano. Dado que son transformadas experimentalmente, las células HEK 293 no son un buen modelo para las células del riñón, no obstante, son fáciles de cultivar y transferir y son comúnmente usadas como modelo para examinar al receptor transferido. Tienen varios marcadores intactos de caminos que pueden ser explorados, especialmente los marcadores ERK, p38 MAPK y JNK los cuales se pueden usar para monitorizar a receptores específicos de transferencias mediante señalización de eventos. Las células son menos útiles para examinar PI3-kinase mediante señalización, ya que muestran típicamente un constante Akt activo. Una importante variación de esta línea celular es la 293T que contiene, además, la SV40 large T-antigen, que permite la replicación de plásmidos transferidos para episomal conteniendo el origen de la replicación del SV40. Esto permite una amplificación de los plásmidos transferidos y una expresión temporal extendida de los deseados productos genéticos. Cabe destacar que cualquier linea celular modificada de forma parecida puede utilizarse para este tipo de trabajo; HeLa, COS y la Célula de ovario de hámster chino son alternativas comunes.

Línea celular HEK 293
Línea celular HEK 293
Línea celular HEK 293

 

Características de la línea celular:

  • Tamaño:13 micrones
  • Adherente/No adherente:semi-adherente
  • Tipo celular:células embrionarias de riñón humano
  • Fuente celular: tejido del riñón
  • Otros:
    • Tiempo de duplicación: 48 horas
    • Expresión proteica: las células pueden ser inducidas a producir grandes cantidades de Interleukin-2
    • Media recomendada: D-MEM high glucose:435 ml, Fetal Bovine Serum50 ml Pen/Strep (100x stock)5 ml L-Glutamine (200 mM stock)5 ml (final concentration 2 mM plus) whatever L-Glutamine is provided in DMEM)

Cultivo de la línea celular HEK 293 :

    Renovar el medio 2-3 veces por semana y seguir realizando conteos celulares entre 1 x 10^5 y 3 x 10^5 células/mL. No permitir que la concentración celular exceda 1 x 10 ^ 6 células/mL Las células también pueden ser subcultivadas por centrifugación y resuspensión en un medio fresco:

    • 1. Transferir la suspensión a un tubo de centrifugado.
    • 2. Rasca el lateral del tubo vaciado para eliminar células adherentes.
    • 3. Resuspende las células recien separadas en 5ml de medio y aspirar con una pipeta pequeña para dispersar los cúmulos.
    • 4. Vierte las células resuspendidas en un tubo de centrifugar con el resto de la suspensión.
    • 5. Centrifugar a 125xg durante 5-7 minutos.
    • 6. Eliminar el mantenedor y resuspender las células con medio fresco.

Cell Growth Protocol for Hek 293 Cell Line

Referencias

Gerry Shaw. "A HEK293 Cell Database by Gerry Shaw"

Life News. "The objection of course is that by using HEK 293"

Hek 293."General Informationabout Hek 293 Cell Line"