Células MCF-7

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Descripción de la línea celular

MCF-7 es una línea celular del cáncer epiteliales usada ampliamente, derivada del adenocarcinoma de pecho. Las células MCF7 mantienen características diferenciadas del epitelio mamario, incluida la habilidad de procesar el estradiol vía receptores de estrógeno citoplásmico. Aunque es fácil de propagar, las células so, generalmente, de crecimiento lento. Las células MCF7 son usadas para detectar componentes MAPK y PI3K, y ERK y Akt de fosforilación. Las células MCF7 expresan particularmente grandes niveles de p70S6K y pueden ser igual de útiles como marcadores para las partes altas de las quinasas como el mTOR y el PDK-1.

Línea celular MCF-7
Línea celular MCF-7
Línea celular MCF-7

 

Características Llínea celular:

  • Tamaño:20-24 micrones
  • Adherente/No adherente: No adherente
  • Tipo celular: Cancer de mama (Mama humana)
  • Fuente celular: Tejido del pecho/mama, derrame pleural(origen)
  • Otros:
    • Aplicaciones científicas: Transfección transitoria
    • Medio recomendado: medio mínimo esencial(Eagle) con 2mM L-glutamina y Earle’s BSS ajustada para contener 1.5g/l de bicarbonato sódico, 0.1 mM aminoácidos no esenciales y 1mM piruvato sódico y suplementado con 0.01 mg/mL de insulina bovina, 90% suero fetal bovino, 10%

Cultivo de la línea celular MCF-7:

  • 1. Usa MEM Eagle’s suplementado con un 10% FBS, 1% penicilina/estreptomicina. También se pueden añadir aminoácidos no esenciales (0.1mM), insulina, (19ug/mL) y piruvato sódico (1mM). Añade 10nM de estrógeno al medio para un incremento de 3-4 veces en las células. Mantén la temperatura a 37º en una humidificada y concentrada atmosfera con CO2(5%).
  • 2. Una vez que las células MCF-7 alcanzan el 90% de confluencia en la placa, quita el medio y traspasa las células por enjuague con 1xPBS dos veces.
  • 3. Añade 2-3mL de solución de 0.25% tripsina- 0.53 mM EDTA caliente(37º) para dispersar la capa celular. Observe bajo el microscopio invertido. La dispersión debería ocurrir entre 5 y 15 minutos. Si las células no se separan correctamente, sitúe el frasco otra vez en la incubadora a 37º. No incubar más de 3 minutos. Nota: No agite o golpee el medio enfriándose durante la dispersión. Esto podría causar cúmulos mientras las células se separan
  • 4. Una vez que la capa de células MCF-7 se ha dispersado (3minutos a 37ºC) desactiva la Tripsina añadiendo 5ml de células / Tripsina-EDTA a 10mL de medio de cultivo completo(ver paso 1) en un tubo estéril. Aspirar las células pipeteando gentilmente.
  • 5. Centrifugar las células en el medio de cultivo durante 5 minutos a 125c g-force.
  • 6. Elimine la tripsina / medio de cultivo en suspensión del tubo.
  • 7. Resuspenda el gránulo (células MCF-7) en 10mL de medio de cultivo fresco (ver paso 1)
  • 8. Coloque 1mL de la suspensión en nuevos platos con 9mL del medio de cultivo original(ver paso1), e incubar a 37ºC en una atmosfera humidificada con 5% CO2.

Cell Growth Protocol for MCF-7 Cell Line

Referencias

Cancer Research, AACR journals " Growth Control of Human Mammary Cancer Cells (MCF-7 Cells) in Culture: Effect of Estradiol and Growth Factors in Serum-containing Medium"

Oncogene. "Gene expression profiling of breast cell lines identifies potential new basal markers"

Breast Cancer Research and Treatment " MCF-7/ADR cells (re-designated NCI/ADR-RES) are not derived from MCF-7 breast cancer cells: a loss for breast cancer multidrug-resistant research"