Los errores más comunes en recuentos celulares

Errores más significativos.

Error por carga incorrecta de la cámara de Neubauer.

Es bastante común cargar la cámara de Neubauer con una cantidad de muestra ligeramente superior o inferior a 10 microlitros. En el primer caso, el cubreobjetos se levanta ligeramente para alojar el exceso de líquido; en el segundo caso, la cámara alojará menos de 10 microlitos introduciendo un error.

Nuestra estimación es que este error no supera el 3-5%.

Reducción del error:

 

Counting chamber error
1) Ser muy cuidadoso a la hora de introducir la muestra en la cámara observando que no haya líquido en exceso.
2) Algunos técnicos, calientan ligeramente el cubreobjetos con su aliento, antes de colocarlo sobre la cámara de recuento. Posteriormente observan que unos anillos multicolor se crean sobre la superficie del cubreobjetos indicando que está bien adherido. Así se evita que se levante cuando el líquido rebose.
3) Mantener las micropipetas perfectamente calibradas.
 


Error Estadístico

Este error se produce al intentar aproximar una población (muestra original) con una muestra de dicha población demasiado pequeña (volumen de recuento).

La mayoría de técnicos de laboratorio utilizan 4 ó 5 recuadros de la cámara de recuento, independientemente de la concentración.

Este error alcanza frecuentemente el 20-30%.

Reducción de error:

1) Para reducir este error, debería tenerse en cuenta el tamaño de la muestra a la hora de calcular la concentración y el número de muestras tomadas.

Para un cultivo de 100 ml, realizando recuento con cámara de Neubauer.

 

Concentración Número de Muestras (1) Margen Máximo de Error
(confidence 95%)
Margen Máximo de Error
(confidence 90%)
1.0 x 106 cel/ml 1 43,10% 36,19%
1.0 x 106 cel/ml 2 30,49% 25,59%
1.0 x 106 cel/ml 3 24,89% 20,59%
1.0 x 106 cel/ml 4 21,56% 18,09%

NOTA: Se realiza la estimación de error asumiendo un coeficiente de variación del 22% para las muestras (estamación basada en nuestra experiencia con miles de conteos realizados en cámara de Neubauer).
(1) Se considera una muestra (estadística), un recuento de 5 recuadros en cámara de Neubauer.

2) Como regla general, algunos laboratorios cuentan 80 ó 100 células, independientemente de la concentración. Esto a veces implica cargar varias cámaras de recuento para calcular una concentración, si ésta es muy baja.

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